Alors qu’ils sont en train de réparer une canalisation souterraine, Mario et son frère Luigi, tous deux plombiers, sont transportés dans un nouveau monde enchanteur à travers un mystérieux conduit. Mais lorsque les deux frères se retrouvent séparés, Mario se lance dans une aventure palpitante pour retrouver Luigi. Dans sa quête, il bénéficie de l’aide précieuse du champignon Toad, un habitant du Royaume Champignon, ainsi que des conseils éclairés de la courageuse guerrière Princesse Peach, qui dirige le Royaume. Ainsi, Mario mobilise toutes ses forces pour mener à bien sa mission.